Delvotest SP-NT
Лекарственное лечение молочного скота от различных заболеваний вызывает появление остаточных количеств медицинских препаратов в молоке в течение определенного периода времени, что крайне нежелательно как с точки зрения здравоохранения, так и по технологическим причинам, специфическим для молочной промышленности. Таким образом, имеется объективная необходимость в простой и надежной системе оценки молока как для молочной индустрии, так и для производителей молока, которые должны стремиться исключить попадание остатков лечебных препаратов в молоко. Исходя из этого, Компания "DSM Food Specialties" разработала стандартный тест для определения остаточных количеств антибиотиков и сульфамидных веществ в молоке, получивший патентованное название «Дельвотест» и отличающийся исключительными преимуществами. «Дельвотест» вошел в российский ГОСТ Р 51600-2000 "Молоко. Методы определения антибиотиков".
ОБОРУДОВАНИЕ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ АМПУЛЬНЫХ ТЕСТОВ
Для инкубационной выдержки ампул (поддержания постоянной температуры) разработан оригинальный сухой нагреватель, работающий от сети переменного тока напряжением 220 В (имеются модификации сухого нагревателя с питанием 12 В постоянного тока, для использования в автоцистерне при перевозке молока), имеющий ряд серьезных эксплуатационных преимуществ перед стандартными водяными банями. Контроль температуры в полости нагрева ампул осуществляется электрическим термометром с дисплеем на жидких кристаллах. Контроль времени осуществляется электронным таймером с аналогичным дисплеем. Комплект для ампульного теста включает в себя также шприц и достаточное количество одноразовых пипеток для отбора проб объемом 0,1 мл.
СОСТАВ КОМПЛЕКТА ПРЕПАРАТОВ
В состав комплекта входят:
4 блока ампул (для модификации МИНИ - 1 блок) по 25 штук каждый, содержащих твердую фиолетовую агаровую среду, включающую стандартизованное количество спор Bacilus Stеагоtermophilus vаг. Саlidolactis С953;
шприц-дозатор для отбора проб молока;
100 штук одноразовых пипеток (для МИНИ - 25) для отбора проб молока;
пинцет.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
Отрежьте ножницами необходимое количество ампул. Будьте аккуратны, не повредите фольгу на остальных ампулах.
Вскройте ампулы путем протыкания отверстия в алюминиевой фольге шприцом. Отметьте ампулы номерами молочных проб.
Наденьте новую одноразовую пипетку на шприц. Выжмите поршень полностью,опустите кончик пипетки в пробу молока и позвольте поршню под давлением медленно вернуться в свое изначальное положение.
Опустите шприц в соответствующую пробирку, медленно выжмите поршень шприца. Используйте новую одноразовую пипетку для каждой новой пробы молока.
Проверьте температуру инкубатора (64'С, погрешность+/- 0,5°С). Опустите ампулы в инкубатор.Установите таймер на 3 часа или время для проверки.
Расшифруйте цвет в нижней 2/3 твердой агаровой среды ампулы по истечении времени ингибирования.
восстановленного молока;
обезжиренного молока;
прошедших тепловую обработку молока;
сыворотки.
СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Агаровая среда содержит стандартизованное количество спор микроорганизма Bacilus Stеагоtermophilus vаг. Саlidolactis С953 Этот вид бактерий был выбран из-за их высокой чувствительности к большинству антибиотиков, и особенно пенициллина и других бета-лактамных веществ. При хранении в холодных условиях споры сохраняют свою жизнеспособность в течение многих месяцев.
При повышении температуры до 64 оС споры быстро размножаются, что приводит к образованию кислоты. Когда количество этой кислоты становится достаточным, происходит изменение цвета индикаторной среды с фиолетового на желтый.
Вместе с тем, если проба молока содержит ингибируюшие вещества, например остатки антибиотиков, то они будут диффундировать в агаровую среду и, когда их концентрация станет достаточно высокой, они задержат процесс размножения бактерий и, соответственно, образования кислоты. В этом случае цвет теста не изменится на желтый: он останется фиолетовым, если концентрация ингибитора выше предела обнаружения для этого ингибитора, и он будет иметь цвет между фиолетовым и желтым, если концентрация ингибитора близка к пределу обнаружения.
Поведение "рабочих" микроорганизмов, которое включает в себя размножение, развитие и образование кислоты, зависит от температуры выдержки. Как слишком высокая, так и слишком низкая температура вызывают замедление этих процессов, что приводит к увеличению длительности анализа. Отклонения от оптимальной температуры также могут влиять на чувствительность теста по отношению к определенным веществам.
ИССЛЕДОВАНИЯ ДРУГИХ ВИДОВ ПРОБ ПРОДУКТОВ
«Дельвотест» может использоваться для исследования других (жидких) продуктов на наличие антибиотиков. Не возникает никаких проблем при тестировании:
Молоко от других видов животных (овец, коз, буйволиц), сливки, йогурт, шоколадное молоко, кремы и др., а также моча, сок сырого мяса, сыворотка крови, в принципе, могут тестироваться, если такие препятствующие факторы, как жир, кислота или красители будут нейтрализованы.
ПРЕДЕЛЫ ОБНАРУЖЕНИЯ
Таблица показывает уровень определения антибиотиков (Ед./г., или мкг./г) в смешанном, сыром коровьем молоке при использовании метода Дельвотест® СП-НT (Delvotest® SP-NT)
Антибиотики и ингибирующие вещества Уровень определения антибиотиков после 3 часов (x10-3)мкг/г Антибиотики и ингибирующие вещества Уровень определения антибиотиков после 3 часов (x10-3)мкг/г
Гр. β лактам Микролиды
пенициллин 2-3 тилозин 50
ампенициллин 6-7 спирамицин 800-1000
амоксициллин 3-5 эритромицин 200
цефтифур 50-100
цефапирин 6-8
клоксациллин 20-30
Диклоксациллин 10-20 Другие
оксациллин 10 Триметоприм 200-300
сульфамиды
сульфадиазин 100-150 Аминоглицоциды
сульфаметазин 100-250 Гентамицин 200
Неомицин 300-600
тетрациклин
тетрациклин 800
Окситетрациклин 800
Указанные выше показатели в таблице основаны на показаниях желтого/фиолетового до фиолетового цвета и являются индикативными. Положительный результат теста рекомендуется дополнительно подтвердить. Факторами, влияющими на результат теста, являются время инкубации, температура, условия хранения и человеческий фактор.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К МОЮЩИМ И ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИМ ВЕЩЕСТВА М
Вероятность получения ошибочной положительной реакции из-за возможного загрязнения пробы моющими или дезинфицирующими веществами может иметь место только в случае высокой концентрации этих веществ. Если же они применяются для мойки доильного оборудования и обработки вымени, то их конечная концентрация в молоке обычно слишком мала, чтобы повлиять на процедуру тестирования. Обычно «Дельвотест» ингибируется такими веществами только при концентрации 0,1% (100 частей на млн.) или выше. Некоторые примеры приведены в таблице 2.
Таблица 2.
Концентрации некоторых моющих и дезинфицирующих веществ, дающих положительный результат при тестировании
Активный хлор 200 частей на млн.
Иод 150 частей на млн.
Перекись водорода (30%) 600 частей на млн.
Цетримид (четвертичный бромид аммония) 100 частей на млн.
Фармкват (5% четвертичный хлорид аммония) 10 000 частей на млн.
Родалон (четвертичный хлорид аммония) 30 частей на млн.
Нироклар (на основе фософрной кислоты) 500 частей на млн.
Калгонайт (5%дихлоро-изо-цианурат калия) 100 частей на млн.
Сублимат (ртутный хлорид) 10 частей на млн.
Дихромат калия 20 частей на млн.
Азид натрия 50 частей на млн.
Лекарственное лечение молочного скота от различных заболеваний вызывает появление остаточных количеств медицинских препаратов в молоке в течение определенного периода времени, что крайне нежелательно как с точки зрения здравоохранения, так и по технологическим причинам, специфическим для молочной промышленности. Таким образом, имеется объективная необходимость в простой и надежной системе оценки молока как для молочной индустрии, так и для производителей молока, которые должны стремиться исключить попадание остатков лечебных препаратов в молоко. Исходя из этого, Компания "DSM Food Specialties" разработала стандартный тест для определения остаточных количеств антибиотиков и сульфамидных веществ в молоке, получивший патентованное название «Дельвотест» и отличающийся исключительными преимуществами. «Дельвотест» вошел в российский ГОСТ Р 51600-2000 "Молоко. Методы определения антибиотиков".
ОБОРУДОВАНИЕ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ АМПУЛЬНЫХ ТЕСТОВ
Для инкубационной выдержки ампул (поддержания постоянной температуры) разработан оригинальный сухой нагреватель, работающий от сети переменного тока напряжением 220 В (имеются модификации сухого нагревателя с питанием 12 В постоянного тока, для использования в автоцистерне при перевозке молока), имеющий ряд серьезных эксплуатационных преимуществ перед стандартными водяными банями. Контроль температуры в полости нагрева ампул осуществляется электрическим термометром с дисплеем на жидких кристаллах. Контроль времени осуществляется электронным таймером с аналогичным дисплеем. Комплект для ампульного теста включает в себя также шприц и достаточное количество одноразовых пипеток для отбора проб объемом 0,1 мл.
СОСТАВ КОМПЛЕКТА ПРЕПАРАТОВ
В состав комплекта входят:
4 блока ампул (для модификации МИНИ - 1 блок) по 25 штук каждый, содержащих твердую фиолетовую агаровую среду, включающую стандартизованное количество спор Bacilus Stеагоtermophilus vаг. Саlidolactis С953;
шприц-дозатор для отбора проб молока;
100 штук одноразовых пипеток (для МИНИ - 25) для отбора проб молока;
пинцет.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
Отрежьте ножницами необходимое количество ампул. Будьте аккуратны, не повредите фольгу на остальных ампулах.
Вскройте ампулы путем протыкания отверстия в алюминиевой фольге шприцом. Отметьте ампулы номерами молочных проб.
Наденьте новую одноразовую пипетку на шприц. Выжмите поршень полностью,опустите кончик пипетки в пробу молока и позвольте поршню под давлением медленно вернуться в свое изначальное положение.
Опустите шприц в соответствующую пробирку, медленно выжмите поршень шприца. Используйте новую одноразовую пипетку для каждой новой пробы молока.
Проверьте температуру инкубатора (64'С, погрешность+/- 0,5°С). Опустите ампулы в инкубатор.Установите таймер на 3 часа или время для проверки.
Расшифруйте цвет в нижней 2/3 твердой агаровой среды ампулы по истечении времени ингибирования.
восстановленного молока;
обезжиренного молока;
прошедших тепловую обработку молока;
сыворотки.
СУЩНОСТЬ МЕТОДА
Агаровая среда содержит стандартизованное количество спор микроорганизма Bacilus Stеагоtermophilus vаг. Саlidolactis С953 Этот вид бактерий был выбран из-за их высокой чувствительности к большинству антибиотиков, и особенно пенициллина и других бета-лактамных веществ. При хранении в холодных условиях споры сохраняют свою жизнеспособность в течение многих месяцев.
При повышении температуры до 64 оС споры быстро размножаются, что приводит к образованию кислоты. Когда количество этой кислоты становится достаточным, происходит изменение цвета индикаторной среды с фиолетового на желтый.
Вместе с тем, если проба молока содержит ингибируюшие вещества, например остатки антибиотиков, то они будут диффундировать в агаровую среду и, когда их концентрация станет достаточно высокой, они задержат процесс размножения бактерий и, соответственно, образования кислоты. В этом случае цвет теста не изменится на желтый: он останется фиолетовым, если концентрация ингибитора выше предела обнаружения для этого ингибитора, и он будет иметь цвет между фиолетовым и желтым, если концентрация ингибитора близка к пределу обнаружения.
Поведение "рабочих" микроорганизмов, которое включает в себя размножение, развитие и образование кислоты, зависит от температуры выдержки. Как слишком высокая, так и слишком низкая температура вызывают замедление этих процессов, что приводит к увеличению длительности анализа. Отклонения от оптимальной температуры также могут влиять на чувствительность теста по отношению к определенным веществам.
ИССЛЕДОВАНИЯ ДРУГИХ ВИДОВ ПРОБ ПРОДУКТОВ
«Дельвотест» может использоваться для исследования других (жидких) продуктов на наличие антибиотиков. Не возникает никаких проблем при тестировании:
Молоко от других видов животных (овец, коз, буйволиц), сливки, йогурт, шоколадное молоко, кремы и др., а также моча, сок сырого мяса, сыворотка крови, в принципе, могут тестироваться, если такие препятствующие факторы, как жир, кислота или красители будут нейтрализованы.
ПРЕДЕЛЫ ОБНАРУЖЕНИЯ
Таблица показывает уровень определения антибиотиков (Ед./г., или мкг./г) в смешанном, сыром коровьем молоке при использовании метода Дельвотест® СП-НT (Delvotest® SP-NT)
Антибиотики и ингибирующие вещества Уровень определения антибиотиков после 3 часов (x10-3)мкг/г Антибиотики и ингибирующие вещества Уровень определения антибиотиков после 3 часов (x10-3)мкг/г
Гр. β лактам Микролиды
пенициллин 2-3 тилозин 50
ампенициллин 6-7 спирамицин 800-1000
амоксициллин 3-5 эритромицин 200
цефтифур 50-100
цефапирин 6-8
клоксациллин 20-30
Диклоксациллин 10-20 Другие
оксациллин 10 Триметоприм 200-300
сульфамиды
сульфадиазин 100-150 Аминоглицоциды
сульфаметазин 100-250 Гентамицин 200
Неомицин 300-600
тетрациклин
тетрациклин 800
Окситетрациклин 800
Указанные выше показатели в таблице основаны на показаниях желтого/фиолетового до фиолетового цвета и являются индикативными. Положительный результат теста рекомендуется дополнительно подтвердить. Факторами, влияющими на результат теста, являются время инкубации, температура, условия хранения и человеческий фактор.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К МОЮЩИМ И ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИМ ВЕЩЕСТВА М
Вероятность получения ошибочной положительной реакции из-за возможного загрязнения пробы моющими или дезинфицирующими веществами может иметь место только в случае высокой концентрации этих веществ. Если же они применяются для мойки доильного оборудования и обработки вымени, то их конечная концентрация в молоке обычно слишком мала, чтобы повлиять на процедуру тестирования. Обычно «Дельвотест» ингибируется такими веществами только при концентрации 0,1% (100 частей на млн.) или выше. Некоторые примеры приведены в таблице 2.
Таблица 2.
Концентрации некоторых моющих и дезинфицирующих веществ, дающих положительный результат при тестировании
Активный хлор 200 частей на млн.
Иод 150 частей на млн.
Перекись водорода (30%) 600 частей на млн.
Цетримид (четвертичный бромид аммония) 100 частей на млн.
Фармкват (5% четвертичный хлорид аммония) 10 000 частей на млн.
Родалон (четвертичный хлорид аммония) 30 частей на млн.
Нироклар (на основе фософрной кислоты) 500 частей на млн.
Калгонайт (5%дихлоро-изо-цианурат калия) 100 частей на млн.
Сублимат (ртутный хлорид) 10 частей на млн.
Дихромат калия 20 частей на млн.
Азид натрия 50 частей на млн.
В связи с изменениями курсов валют по вопросам, связанным с ценами, сроками поставки и наличию на складе следует обращаться к менеджерам.
